辣根过氧化物酶
Horseradish Peroxidase
(酶标记专用)
货号 |
包装规格 |
Cat:CH0202 |
10mg |
Cat:CH0203 |
100mg |
Cat:CH0204 |
1g |
贮存:4℃保存,稳定期不低于3年。
产品简介:
Galaxybio公司生产的辣根过氧化物酶是以辣根为原料,经过水的抽提,硫酸铵和丙酮分级分离,再经锌离子纯化,离子交换层析,透析除盐,冰冻干燥,得到高纯度高活力的辣根过氧化物酶。
本产品是用于酶标记的专用HRP,高纯度、高活力、不含影响标记的小分子,标记率高,活性不低于国外知名品牌。
主要技术指标:
RZ:>3.0,
活性:>300 IU/mg
水溶解度:c >50 mg/ml
过氧氢酶:<0.005
其他过氧化物酶 <0.00005
HRP 背景资料:
辣根过氧化物酶 (horse radish peroxidase,简称HRP,EC.1.11.1.7)。HRP广泛地分布于植物界,以辣根中含量最高。它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉辅基组成的一种糖蛋白,含糖量18%,由300个氨基酸和4个二硫键连接而成。分子量40 000,等电点5.5~9.0之间,它催化的最适pH因供氢体不同而有所差异,但多在pH5.0左右。HRP易溶于水和58%以下的饱和硫酸铵溶液。
HRP酶蛋白和其它杂蛋白的最大吸收光谱为275nm,辅基部分的最大吸收光谱为403nm,二者比值OD403/OD275为酶的纯度。以RZ值(Reinheit Zabl德文)表示。RZ>3为高质量,RZ>2.5为中等质量,RZ<2.5则需要纯化。
HRP 活性测定:
以愈创木酚(邻甲氧基酚,guaiacol)为氢给体,光程1cm,每分钟A470nm增加0.001所需酶量定为1个HRP活力单位.用作标记的过氧化物酶活性一般要大于250units/mg。
HRP 常见底物:
供 氢 体 |
显色 |
波长 |
终止剂 |
显色 |
测定波长 |
TMB |
兰 |
630 |
2M H2SO4 |
黄 |
450 |
联大茴香胺(OD) |
桔红 |
512 |
5M HCI |
黄 |
400 |
邻苯二胺(OPD) |
黄 |
444 |
2M H2SO4 |
桔黄 |
492 |
邻苯甲苯胺(OT) |
兰 |
636 |
2M H2SO4 |
黄 |
442 |
数种颜色反应底物中,TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用,OPD等等其他有致癌作用,使用时需注意