单组分TMB显色液
保存:2-8°C,请勿冷冻。
稳定性:2-8°C条件下,大于18个月。
敏感性:高于AB双液。 组成:TMB,稳定剂。 产品外观:单组分TMB过氧化物酶底物正常情况下淡黄色、淡蓝色或者是淡绿色。底物溶液在650nm时检测OD值小于0.04。 |
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产品说明: 可溶型和沉淀型
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使用方法
使用之前,以超纯水反复洗涤的适当容器,倒出适量单组分TMB底物溶液,即可使用。
加液:加完HRP结合物并温育一定时间后, 洗板3-5次,每孔加TMB底物100-150uL, 37°C温育5-30分钟。 终止(备选):加等体积的1N的HCl或者2N的H2SO4来终止反应。酶标孔中反应液从蓝色变为黄色。 读数:终止反应后,30分钟内在450nm处读数。不加终止液,显色更加稳定,可以在620-650nm处读数, |
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注意: 降低底物强度:如果出现高的反应背景和/或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可以在加入终止液后马上读数;另外,可以进一步稀释一抗和/或HRP结合物。为了降低非特异性背景颜色,推荐进一步降低一抗和/或HRP结合物的浓度,尽量避免降低底物浓度。动力学检测:TMB单组分底物在与过氧化物酶反应时产生一种蓝色,可以在加底物后620-650nm处读数,不需终止反应 |