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      首页产品分类目录分子生物免疫诊断→Glue活化辣根过氧化物酶(B 型)---2小时快速标记抗原、抗体、多肽及化学小分子

      Glue活化辣根过氧化物酶(B 型)---2小时快速标记抗原、抗体、多肽及化学小分子

GalaxyBio Code
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价格
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WB2205B
32ugx5
200元
WB2205B
32ugx10
320元
WB2210B
64ugx5
200元
WB2210B
64ugx10
320元
MD010B
1mgx5
1500元
MD010B
1mgx10
2500元
MD020B
3mgx3
2200元
MD020B
3mgx5
3200元
MD020B
3mgx10
6000元
MD050B
50mg
11000元
MD100B
100mg
20000元

产品简介

Glue

活化辣根过氧化物酶

(B 型)

货号

规格

(HRP/支)

数量

(支)

价格

标记抗体的量/支

(160KDIgG为标准)

Cat:WB2205B

32ug

5

200

约5 ug/支

 

10

320

Cat:WB2210B

64ug

5

200

约10ug/支

 

10

320

Cat:MD010B

1mg

5

1500元

约100ug~0.5mg/支

10

2500元

Cat:MD020B

3mg

3

2200元

约300ug~1.5mg /支

 

5

3200元

10

6000元

Cat:MD030B

10 mg

1

2200元

约1~4mg /支

Cat:MD040B

100 mg

1

20000元

约10~50mg mg/支

Cat:MD050B

50 mg

1

11000元

约5~25mg mg/支

 

贮存条件:

低温运输,-20℃贮存,有效期一年。

生产日期:见包装

产品简介     

※  Galaxybio 公司研发的活化HRP,对优质辣根过氧化物酶次序偶联,再活化,使辣根酶富含活性基团。一经活化的HRP,极易和含氨基NH2的小分子或蛋白氨基NH2的共价结合。因此使用本方法标记物,具有标记率高、活性好、本底低及非常敏感等特点。敏感性一般是传统过碘酸法标记3~5倍。微量包装的活化HRP,特别适合科研用的昂贵抗体的标记。也适合抗体抗原活性的检测。

※  一步标记,简便快速。与待记抗原或抗体混合后(约12个小时过夜标记或37℃2小时。)

※  可以微量标记,节省昂贵的抗原抗体

※  无需透析,即时使用;

※  标记率极高,可大于95%;敏感性一般是传统过碘酸法标记3~5倍。

※  本试剂盒针对氨基进行标记,故只对含有氨基的分子。可以进行抗原或其他蛋白的标记。小分子的标记,如瘦肉精、DNA、多肽等等,标记时,如要提高HRP的利用率,可以加入过量的小分子,然后透析除去游离的小分子;如果要即时使用,参考蛋白抗原的标记,减少小分子的用量,从而减少游离的小分子。

※  本底远远低于其它方法。

注意事项:

1. 抗原抗体如果是存在于硫酸铵、甘氨酸或Tris缓冲液中,需以PBS缓冲液充分透析,也可以超滤离心管进行超滤;微量的含NH2 的小分子,会严重影响标记率。

2. 反应体系一般100μl~300ul /1mgHRP;太小,可能发生自身交联;也不要太大,太大会影响标记率

3. REAGENT Ⅲ 终止液,封闭残余活化基团。

4. 注意反应 pH值约维持在9.5左右。pH值太低,多加反应启动剂。

 

5.特别提醒,是后续试验中,酶标板条种类不同,本底差异特别大。当本底高时,以较高浓度蛋白溶液封闭的酶标板,同时把酶标稀释液的蛋白浓度加大。如果问题依旧存在,请联系我们技术咨询。

6 本试剂仅用于科学研究;

操作步骤

以1mg活化HRP,标记抗体为例(反应体系根据HRP的mg数相应增加)

        1. 准备待标记物:以蒸馏水或超纯水把待标记物溶解成约1mg/ml。

2. 取100ul抗体溶液(1mg/ml)转入REAGENT Ⅰ活化辣根氧化物酶。

※简短离心,使辣根过氧化物酶沉到管底,辣根酶管壁上的干粉HRP要完全冲洗溶解。

※总的反应体系控制在100ul/mg活化HRP左右,体系增大影响标记率。

※按照按mg活化HRP对应抗体100ug~500 ug、抗原50ug~250ug,HRP:X的分子mol比保持在30:15~1左右。

3. 以REAGENTⅡ调pH值至9.5左右(大约10ul,因抗体用的缓冲液的差别,量有所不同,但确保PH在9.0以上,可以多加REAGENTⅡ,并准确记录REAGENTⅡ的使用量,以备下一步用)。 37℃2小时、或4℃过夜。 

※检测PH的方法:取一新管尖,吸取标记物溶液,然后排尽液体,拿管尖点在PH试纸上,比对即可。

4. (备选步骤)加入微量硼氢化钠。(适合酶标物长期放置的,即时使用无需添加。取200ul的枪头,插入硼氢化钠粉末,在管尖处有看得见白色粉末,再转移到酶标物物,吹打溶解混匀即可)。

5. 加入REAGENTⅢ(约3倍体积的REAGENTⅡ。例如上一步用去REAGENTⅡ10ul,这一步加入REAGENTⅢ30~50ul。但确保酶结合物PH在7.0左右,可以多加REAGENTⅢ调整),混匀终止反应。

6. (备选步骤,甘油能更好稳定酶结合物活性)加甘油至50%,-20℃保存。

注:如果抗原(或抗体)为溶液状态,从步骤2开始操作。

特别提醒:后续试验中,酶标板条种类不同,本底差异特别大。当本底高时,以较高浓度蛋白溶液封闭的酶标板,同时把酶标稀释液的蛋白浓度加大,增加洗涤次数。如果问题依旧存在,请联系我们技术咨询。

推荐使用:包被了蛋白、或抗原、或抗体的酶标板的稳定,和稀释液的抗原或抗体的稳定,请购买本公司的相关产品。底物显色,本公司提供单组分TMB

和双组分TMB AB液,4~8℃可稳定数年。

 

附带缓冲液清单:

 

REAGENT Ⅰ活化辣根过氧化物酶

见包装

REAGENT Ⅱ反应启动剂

1.0ml(PH9.6)

REAGENT Ⅲ 终止液

1.0ml(PH7.0)

硼氢化钠

少许。

说明书

1份

 

 

 

Glue A型和B型活化辣根过氧化物酶标记特点

 

Glue A

Glue B

标记速度

快、1小时可完成标记

同A

标记条件控制

容易

同A

标记效果

很好

同A

 

 

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