R-RVC
病毒总RNA快提试剂盒
试剂盒内容 |
50次 Cat:RN150 |
250次 Cat: RN160 |
Miniprep column |
50 |
50×5 |
2 ml microfuge tube |
50 |
50×5 |
溶液RN1 Buffer RN1 |
25 ml |
25 ml×5 |
溶液RN2 Buffer RN2 |
15 ml |
15 ml×5 |
RNA Carrier |
350ul ml |
350ul×5 |
溶液RW1 Buffer RW1 |
15 ml |
15 ml×5 |
溶液RW2 Buffer RW2 |
15 ml |
15 ml×5 |
溶液TE Buffer TE |
10 ml |
10 ml×3 |
说明书 Protocol |
1 |
1 |
贮存条件:
RNA Carrier -20℃保存,其他室温或4℃,有效期2年。
产品简介:
※ GalaxyBio 公司与美国公司通力合作,由美方提供全方面技术、关键纯化材料,将核酸纯化等系列产品,在国内推广,实现了进口产品本土化生产。每种产品通过严格的技术把关,已达到进口产品的品质,而价格上却是国产试剂盒的价位
※ 采用独特的组织细胞裂解沉淀技术,快速、方便,高得率、高纯度。
※ 提取的RNA分子完整、纯度高,适用于Northern Blot 、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension、RNase保护测定、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
注意事项:
1. 所有试剂用DEPC处理过的溶剂配制。请选用RNase-free枪头和离心管,以避免提取过程中RNA被RNase降解。
操作步骤:
1.试验前准备及注意事项
试剂盒在第一次使用前请按试剂瓶标签说明在溶液RW1 和溶液RW2中加入无水乙醇,并做好标记;溶液使用后,避免长期暴露于空气中,用后请及时盖紧盖子,密闭保存。
3. 12,000×g 离心10 min。
* 4℃条件下离心。
4. 取上清至1.5 ml离心管中,每140ul加入1ul RNA Carrier 。加入0.6体积的异丙醇(或加入1体积无水乙醇),混合均匀。
步骤5-9可选择硅胶膜吸附法或离心沉淀法:
* 硅胶膜吸附法与离心沉淀法相比,前者更纯净,而后者提取量大,如病毒拷贝较少时,可采用后者。
A. 硅胶膜吸附法
5A. 将制备管置于2 ml (试剂盒内提供) 离心管中,转移步骤4中的混合液到制备管中,6,000×g离心1min。
* 4℃条件下离心。
6A. 弃滤液,将制备管弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,制备管中加入700 μl Buffer RW1,12,000×g离心1 min。
* 确认在Buffer中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
7A. 弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,在制备管中加入700 μl Buffer RW2,12,000×g离心1 min;以同样的方法再用700 μl Buffer RW2洗涤一次。
* 确认在Buffer W2 concentrate中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
8A. 弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,12,000×g离心1 min。
9A. 将制备管放入干净RNase-free的1.5 ml离心管中,在制备管膜中央加60-100 μl Buffer RTE (DNase﹠RNase-free) 。室温静置1 min,12,000×g离心1 min,洗脱得RNA
B. 离心沉淀法
5B. 12,000×g离心10 min,尽量弃去上清。
6B. 加入700 μl Buffer RW1,2,000×g离心5 min。
* 确认在Buffer Buffer RW1中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
7B. 弃去管中溶液,加入700 μl Buffer RW2;2,000×g离心5 min。
* 确认在Buffer W2 concentrate中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
8B. 弃去管中溶液,自然干燥。
9B. 加入10-50 μlBuffer TE (DNase﹠RNase-free) ,溶解RNA。
RNA定量及纯度检测