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      首页产品分类目录分子生物RNA提取→RNAlater----组织RNA样品保存液

      RNAlater----组织RNA样品保存液

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RN108
50ml
380元
RN109
100ml
680元

产品简介

RNAlater

_______组织RNA样品保存液

试剂盒内容

规格

 Cat:RN108

50ml

Cat: RN109

100ml

 

贮存条件:

室温,有效期2年。

 

产品简介:     

※ 在离体状态下组织及细胞中的RNA很不稳定,极易降解。从新鲜组织或细胞中提取RNA时,样品若不能马上处理,则通常需要置于液氮保存,极不方便。RNAlate是一种无毒的可直接使用的样品储存液,可使RNase失活,从而保持新鲜组织样品里的RNA免受降解。置于该溶液中的新鲜组织或细胞可在没有液氮或超低温冰箱的条件下保存较长时间而不影响RNA的完整性,从而有效地解决了样品保存及运输的问题。

※  产品描述 RNAlater是一种液态的,无毒的组织保存试剂。它能迅速稳定组织,保护非冷冻细胞RNA于原位。获得组织块后,迅速浸泡在 RNAlater中保存,而不会引起RNA的降解,这样可以不必马上处理样本或将样本冷冻在液氮之中以备以后处理。

  ※  RNAlater应保存在室温下,保质期6个月。如放置在4℃条件下则会引起沉淀,此时需加热到37℃才可澄清。 RNAlater可广泛应用于多种脊椎动物样本。包括脑、心、肾、脾、肝、睾丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺。RNAlater对大肠杆菌、果蝇、组织培养细胞、全血细胞和一些植物也有效。

※  RNAlater不影响样品的后续处理,可以配合各种常见的 RNA抽提试剂盒使用,例如TRIzol、RNAzol、各种RNA提取试剂盒、酚抽法以及利用Oligo(dT)原理的mRNA抽提试剂

 

RNAlater的使用方法

1. RNAlater 只能用于新鲜组织,在浸入RNAlater之前不能冷冻组织。简单切碎组织样本,任何一边的最大厚度不能大于0.5cm, 然后将组织碎块放入到5倍体积的RNAlater中保存。

   动物组织 RNAlater不会溶解或破坏组织样本的结构。如果需要的话,仍可将已经平衡在RNAlater溶液中的组织取出并分割成更小的块再重新放入到

 

RNAlater中。小器官如鼠肝、肾和脾可以完整地保存在RNAlater中。

   植物组织许多植物组织可以简单浸泡在5倍体积的RNAlater中保存。具有自然屏障防止扩散的植物如蜡表皮的叶组织可能需要先破坏其屏障,以允许RNAlater进入组织

   组织培养细胞沉淀细胞,用PBS洗一次,再用少量的PBS悬浮细胞,然后加5~10倍体积的RNAlater保存。

   白细胞如果将白细胞从红细胞和血清中分离出来,并按组织培养细胞一样处理后,白细胞便能有效地保存在RNAlater中。不要将全血、血浆或血清中的RNA保存在RNAlater中,因为它们蛋白含量过高,与RNAlater混合后易形成不溶的沉淀。

   细菌( 以下内容是根据Ambion公司的产品说明书编译的,仅供参考)

RNAlater是抑菌的,虽然细菌在RNAlater中不能生长,但细胞仍保持其完整性。大肠杆菌保存在RNAlater中4℃条件下1个月仍很完整,产生不降解的RNA。

 

2. RNAlater中样品的保存

   保存于-80℃ 建议用于批量保存。将样本在4℃条件下孵育过夜,然后从RNAlater溶液中取出样本保存于-80℃。对于组织培养细胞,不必移去RNAlater,只需简单冻存整个溶液。实验证明,细胞在-80℃条件下冻存于RNAlater溶液中并未出现溶解。样本可随后在室温下解冻及再冻存,其RNA的质和量都不会受到影响。

   保存于-20℃ 建议用于批量保存。将样本在4℃条件下孵育过夜,然后转移到-20℃。样本在-20℃条件下不会冻结,但在存贮缓冲液中会有结晶形成,这并不影响随后的RNA提取。样本可随后在室温下解冻及再冻存,其RNA的质和量都不会受到影响。

   保存于4℃ 目前尚无证据证明样本存于4℃ 1个月内会出现RNA降解。

   如果没有冰箱 将样本放在尽可能冷的环境中。如果周围温度超过25℃,应尽可能使RNAlater中的样本冰浴数小时。

 

3. RNAlater 中样本的RNA提取

   组织 用消毒镊子将组织从存贮溶液RNAlater中取出,浸泡在RNA提取溶液中。一旦将组织放入RNA提取溶液中,匀浆一定要迅速进行。

   细胞 从存贮在RNAlater中的细胞中提取RNA有两种操作方法可供选择:去除RNAlater或者从细胞与RNAlater的混合物中直接提取RNA。

 

4. 从RNAlater 中取出样品

   去除RNAlater 因为RNAlater的浓度比典型的细胞培养介质的浓度高,因此用通常沉淀活细胞的离心力无法沉淀RNAlater中的细胞。离心沉淀细胞,去除RNAlater。(HeLa细胞大约需要3000×g,但其他细胞可能不能容忍这个速度,或者他们需要更大的离心力。)

   从RNAlater中的细胞直接提取RNA 作为选择,我们可以用一步法破碎/提取溶液(如TRI Reagent和 RNAwiz )从没有去除RNAlater的细胞中纯化RNA。这可通过向细胞混合物中加入10倍体积的一步提取溶液完成,其他照常。

 

 

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