DNA Polymerase
﹡2×LATaq BufferⅡ含有PCR增强剂,可以同时做PCR,择优使用;又可分为含Mg2+和不含Mg2+两种,用户可自选。不特别要求通常提供含Mg2+的。
■ 浓度:1.25U/µl ■ 贮存:-20℃保存,稳定期2年
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■ 使用方法:(50ul体系) ddH2O ?μl 2× LATaqBuffer 25 μl dNTP Mixture(各10 mM) 1 μl Template DNA(λDNA) 2.5 ng(?μl) Primer 1(10 μM) 1 μl Primer 2(10 μM) 1 μl GA LATaq(1.25U/µl) 2μl up to 50 μl ■ PCR设置(供参考):
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■ 产品说明 GA LATaq是本制品是应用LA PCR原理研制的具有3′→5′Exonuclease活性(Proof reading活性)的耐热性DNA聚合酶。在扩增大于10 kbp的DNA片段具有明显优势,而且保真性能强。使用本产品扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基,因此可直接克隆于T-Vector中。 ■ 活性定义 用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。 ■ 纯度检验 SDS-PAGE检验纯度大于99% ;50 U的本酶和1.8 μg的pUCm-T质粒 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化,说明无核酸酶活性。
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■ 产品性能 1)以λDNA为模板,可很好地扩增35 kbp的DNA片段。 2) 以人基因组DNA为模板,可很好地扩增17.5 kbp(β-Globin gene)的DNA片段。 3)对于富含GC的模板或长片段的模板,不仅需调整引物和模板的含量,参与反应的Buffer更为关键。本公司提供如下2种GC Buffer的优化组合包装,对于难以扩增的长片段可以迎刃而解。
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