GA Pfu TM -------重组高效Pfu DNA Polymerase
﹡5×Pfu BufferⅡ含有PCR增强剂,可以同时做PCR,择优使用;又可分为含Mg2+和不含Mg2+两种,用户可自选。不特别要求通常提供含Mg2+的。 贮存:-20℃保存,稳定期1年 | |||||||||||||||||||||||
■ 产品内容 PC200 GA Pfu (1.25U/ul) 200ul 5×Pfu BufferⅠ (Mg2+plus) 1ml 5×Pfu BufferⅡ (Mg2+plus) 1ml dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul 6×Loading Buffer 1ml PC201 GA Pfu (1.25U/ul) 200ul×4 5×Pfu BufferⅠ (Mg2+plus) 1ml×4 5×Pfu BufferⅡ (Mg2+plus) 1ml×4 dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul×4 6×Loading Buffer 1ml×4 PC202 GA Pfu(1.25U/ul) 200ul×12 5×Pfu BufferⅠ (Mg2+plus) 1ml×12 5×Pfu BufferⅡ (Mg2+plus) 1ml×12 dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul×12 6×LoadingBuffer 1ml×6 PC200 (Buffer Mg2+free) GA Pfu (1.25U/ul) 200ul 5×Pfu BufferⅠ (Mg2free) 1ml 5×Pfu BufferⅡ (Mg2+plus) 1ml MgCl2(25Mm) 1ml dNTP Mixture(各2.5Mm) 800ul 6×Loading Buffer 1ml dNTP 浓度 各2.5mM 200ul 状态 水溶液(A钾盐,PH7.0~9.0) 纯度 各98%以上 |
■ 产品说明 Pfu DNA Polymerase是一种从Pyrococcus furiosus中分离得到的热稳定性酶,分子量大约为90kD。该酶兼具有5`-3`方向发生聚合反应和3`-5`外切酶(校正)活性,可将错配的碱基切除。因而Pfu DNA聚合酶用于高保真的PCR反应和引物的延伸反应。Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平端。 ■ 活性定义 用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。 ■ 纯度检验 SDS-PAGE检验纯度大于99% ;50 U的本酶和1.8 μg的pUCm-T质粒 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化,说明无核酸酶活性。 ■ 产品性能 1.高保真:在所有热稳定性聚合酶中,Pfu DNA聚合酶的错误几率最低。
2.热稳定性检测: 94ºC时,每微升5单位Pfu DNA 聚合酶在缓冲液中的半衰期长于1时。
3.以λDNA为模板,可以很好地扩增8kbp的DNA片段。
4.长片断的扩增,与模板的结构和设计的引物有很大关系。如本品扩增长片段不理想, 请采用本公司的LATaq,EXTaq, LAPower DNA Polymerase。
■ 反应举例(50ul体系,供参考)
|